上皮細(xì)胞是什么
人體的細(xì)胞有很多,不同的細(xì)胞在作用上都是不同的,因此對(duì)細(xì)胞也是需要進(jìn)行全面認(rèn)識(shí),這樣的人體細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題的時(shí)候,都知道它對(duì)人體健康有著怎么樣的損害,人體各部位的喜歡是不一樣的,而且數(shù)量上也是不同,那上皮細(xì)胞是什么呢,在這個(gè)問(wèn)題上也是很多人不太清楚的。
很多人低上皮細(xì)胞是什么并不了解,對(duì)這類問(wèn)題都是可以進(jìn)行詳細(xì)咨詢,使得對(duì)上皮細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候,都是知道該選擇什么樣的方法最佳,同時(shí)不會(huì)損害自身健康。
上皮細(xì)胞是什么:
上皮細(xì)胞培養(yǎng)
1)表皮細(xì)胞培養(yǎng)
1.取材:取外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。
2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。
3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過(guò)夜。
4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。
5.溫消化:取出表皮單獨(dú)處理,用剪刀剪成更小的塊后,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分鐘。
6.用吸管輕輕反復(fù)吹打,使成細(xì)胞懸液。
7.培養(yǎng)液:通過(guò)80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過(guò)后,低速離心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,制成細(xì)胞懸液,接種入碟皿中,CO2溫箱培養(yǎng)。
2)乳腺組織培養(yǎng)
直接培養(yǎng)法:(適于培養(yǎng)含纖維少的軟組織)
1.在含有少量培養(yǎng)液或Hanks液的容器中,用鋒利刀片將組織反復(fù)切割成碎塊。
2.把組織碎塊連同液體注入離心管中,再補(bǔ)加少許培養(yǎng)液,用吸管吹打片刻,置試管架3~5分鐘。吸除上層液可排除非乳腺細(xì)胞部分。重復(fù)2~3次。
3.末次處理結(jié)束后,向沉降管中再補(bǔ)加培養(yǎng)液,用吸管稍吹打,使沉降物重懸。不待細(xì)胞團(tuán)塊下降立即通過(guò)3~4層無(wú)菌紗布濾入另管中。
4.調(diào)整好適宜密度,接種入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
膠原酶消化法:(適于處理含纖維多的較硬組織)
其過(guò)程與培養(yǎng)其它組織相同。
3)胃上皮細(xì)胞培養(yǎng)
1.取材:取胃潰瘍或胃癌手術(shù)切除胃標(biāo)本遠(yuǎn)端非病變區(qū)粘膜少許。
2.清洗:用含慶大霉素(400微克/毫升)和二性霉素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗后,用鈍器剝離下粘膜,剪成1mm3大小。
3.消化:在I型膠原酶和透明質(zhì)酸酶中,于37℃中消化80分鐘。
4.離心:收集細(xì)胞懸液,800轉(zhuǎn)/分離心后,Hanks液漂洗兩次。
5.接種:末次離心后加入含有1%~2%胎牛血清的完全培養(yǎng)基,接種入不同孔數(shù)的培養(yǎng)板中,接種量依不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?/p>
4)肝細(xì)胞培養(yǎng)
初代組織塊培養(yǎng):取新鮮肝臟,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3左右的小塊,采用帖壁培養(yǎng)法。
5)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)
1.取產(chǎn)后的新鮮臍帶。如不立即培養(yǎng)可以保存于4℃中,但不宜超過(guò)12小時(shí)。無(wú)菌剪取長(zhǎng)10~15厘米一段。其它如胚胎和幼體動(dòng)物的大血管,亦可用于培養(yǎng)。
2.先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中,洗除殘血,注入口處宜用線繩結(jié)扎,以防液體返流。
3.用血管鉗夾緊臍帶一端,從另端向臍靜脈中徐徐注入最終濃度為0.1%的膠原酶,待末端出現(xiàn)液體后結(jié)扎之,令充滿血管,注入口亦應(yīng)結(jié)扎,以防液體返流,消化3~10分鐘。
4.吸出含有內(nèi)皮細(xì)胞的消化液,注入離心管中,為獲取更多細(xì)胞,可再注入溫PBS沖洗2~3次徹底清除干凈殘余細(xì)胞,一并注入離心管中離心。
5.吸除上清,加1640培養(yǎng)液,制成細(xì)胞懸液,接種入瓶皿中培養(yǎng),順利時(shí)2~3天內(nèi)細(xì)胞即可長(zhǎng)成單層。
通過(guò)以上介紹,對(duì)上皮細(xì)胞是什么呢,也是有著一些介紹,上皮細(xì)胞培養(yǎng)的方法是什么呢,都是有著詳細(xì)說(shuō)明,不過(guò)在對(duì)它培養(yǎng)的時(shí)候,不能強(qiáng)行進(jìn)行,要根據(jù)自身需求進(jìn)行選擇,這樣對(duì)人體各方面,才會(huì)有很好的幫助。
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